荧光显微镜的工作原理

荧光显微镜的工作原理

荧光显微镜是不太了解常见的显微镜，下面向我们大家介绍分析一下荧光显微镜的原理。工业视频显微镜将传统的显微镜与摄像系统,显示器或者电脑相结合,达到对被测物体的放大观察的目的。金相显微镜电脑型金相显微镜或是数码金相显微镜是将光学显微镜技术、光电转换技术、计算机图像处理技术完美地结合在一起而开发研制成的高科技产品，可以在计算机上很方便地观察金相图像，从而对金相图谱进行分析，评级等以及对图片进行输出、打印。体视显微镜指从不同角度观察物体,使双眼引起立体感觉的双目显微镜。

荧光显微镜原理：

在一百年前，斯托克（STOKES)发现自然界有许多物质能在较短波长光线照射下， 发出较长波长的光线，也即这些物质在被紫外光、紫光、兰光或绿光照射后，能激发出蓝色、绿色、黄色或红色的荧光，叫做光致荧光。

因此，1911年，奥地利科学家K.Reichert首先制作了一种实用的荧光显微镜，用碳弧灯作为激发光源，用液体滤光片分离所需的紫外光，并用普通显微镜观察。

当时，荧光显微镜在植物学和矿物学中使用初级荧光技术以获得良好的分析结果，但由于人和动物的初级荧光太弱，不能用于人和动物的医学研究。

1933年，海廷格发现了第二种荧光。标本经荧光染色后，用短波光激发，获得强荧光，适用于人和动物的研究。

免疫学的重要对象是抗原和抗体的反应社会问题，由于自身抗原抗体反应的高度可以特异性，所以当抗原抗体可能发生发展反应时，只要我们知道他们其中作为一个影响因子，也就知道了另一个主要因子，用普通染料来使抗体（或抗原）着色，由于被视觉系统所能感知的染料分子的数量比较大，往往破坏了抗原或抗体的特异活性而不能没有达到教学目的。

荧光染料本身作为发射体产生颜色，可以在暗背景下观察到，对人类视觉高度敏感，并且可以在显微镜下用很少的光感知，这使得荧光染料成为一种合适的标记物，不仅保持了标记抗体的特异性活性，而且可以在荧光显微镜下用肉眼检测到。

在制备荧光样品过程中，将抗原固定在载玻片上，然后用荧光抗体染色（荧光染料与抗体结合）一段时间，将抗体固定在抗原上，否则用水冲洗掉，*后在荧光显微镜下观察结果。

每一种细菌方面都有一个自己的特异抗原，因此，在原则上，应用充分的特异的荧光抗体，可以从血清学上鉴定没有任何作为一种通过细菌。

由于荧光染料只能在很稀的浓度下激发出明亮的荧光，因此一般对身体无害，从而为体内观察提供了广泛的可能性，如研究功能器官的过程和微观结构，一些代谢变化等。此外，荧光染料染色法非常简单，耗时短，易于制备标本，特别适用于快速工作，如传染病的快速诊断等。

以下为学生激发产生荧光时的原理图：

1. 光源——它提供激发荧光所需要的足够强的激发光（较短波长光线），通常它是超高压汞灯(HBO200, HBO100或B050)。